2切片厚度50~100nm為宜:太薄反差低;太厚反差好,但結構重疊,電子束不能穿透;,3切片應耐電子束的強烈照射,不變形不升華;,4切片能夠適當被染色,保證一定的反差;,5切片均勻,無影響拍照的皺褶、刀痕或染色污染,其中,DigitalMicrograph不僅能夠自動識別Gatan公司電鏡拍攝的dm3、dm4、Tif文件中的標尺、放大倍數、儀器型號等信息,還能夠對圖片中進行上偽色突出對比度、選區傅里葉變換、劃線取向灰度分析等。
沿管壁緩慢加入戊二醛預固定液,不要沖擊細胞團,靜置30min后可送樣,請在4~10℃保存或運輸,嚴禁結冰(太靠近冰箱后壁或冰袋運輸都可能使樣品結冰,冬季寧可常溫送樣),細胞高速離心收集方法,本方法過去被大多數單位采用,沒有“GT2”時的應急取材也可使用,各儀器公司的拍攝控制軟件是比較專業化的處理工具,能夠在處理基本粒徑分析、晶面間距等測量外,還能夠進行傅里葉變換、降噪處理等,得到更加深入的數據結果。
染色方法有單染,包括鉛鹽單染和鈾鹽單染;雙染色,醋酸鈾染色和檸檬酸鉛染色,雙染色呈現結果更全面,我們一般采用的雙染法進行染色,常用染色劑:醋酸鈾,有微弱的放射性,主要染核酸、核蛋白、細胞核、結締組織,檸檬酸鉛,主要染膜結構、脂類、糖原等,易與CO2反應成沉淀,染色中應采取措施避免,電鏡照片主要解析粒徑分布、單晶/多晶、晶面結構、元素和原子分散,其本質是信號的空間分布,基本機理與比例尺地圖是一致的。