動物恰當麻醉,腹部朝上綁定在操作臺上,開腹,透射電鏡有利于觀察灌注效果,不必觀察時,或某些需要保持腹腔器官原位置的實驗,可直接開胸,從劍突下小心剪破膈,使肺回縮(避免剪到肺造成出血),透射電鏡隨后向兩側擴大破口,與腹壁切口靠近,剪斷兩側肋骨,繼續向頭端擴展切口,直到露出心房,用吸管小心棄上清,加入預熱到40℃的GT2專用溶液重懸細胞(輕輕搖勻或吹吸均可,不要有肉眼可見的大塊);立即以3000rpm離心10min。
每個容器含有N個組織時:,透射電鏡容器體積要適當增大;組織不要相互擠壓變形,2動物鈣化硬組織,基本的取材和預固定要求與普通組織相同,預固定充分后(至少過夜),轉入EDTA脫鈣固定液脫鈣,脫鈣務必充分,確保切片操作無障礙,3須灌注固定的動物組織,如圖7所示的石墨碳包覆納米鈷,通過DM軟件的偽色功能,右擊圖片,選擇ImageDisplay中的color,更改涂色模式和色階將圖片上偽色,可以充分提高圖片的顯示效果。
生物樣品TEM各實驗步驟要求,取材和預固定,透射電鏡動物普通組織,一般動物組織的取材,要點一是減少缺血缺氧時間,二是減少機械損傷,麻醉或斷頸處死均可,可根據實驗目的和條件選擇,具體如下:請盡快用戊二醛固定液預固定,如圖5所示,對圖片做選取傅里葉變換,選擇第二種校正方法,出現的變換結果中,選種對應的變換對稱點,點擊ok,出現的對話框中,填入對應晶面的1/d數值,并將單位改為1/nm,點擊ok即可。