該過程控制在1min內完成,(zui好有壓力控制裝置,如果沒有,zui好采用吊瓶,瓶的懸掛高度應通過動物血壓的厘米水柱數值估計,小鼠、大鼠等一般掛在高于動物身體1,5m處,停止鹽水灌注,通過三通管換用固定液繼續灌注(室溫),初始速度與鹽水一致;當動物開始強烈抽搐后,降低流速,透射電鏡從輸液器膠囊觀察窗看,維持每秒2滴,(10)常規手術取材、切割標本,浸泡固定30min后轉入4℃冰箱過夜(此步驟同普通組織取材)。
每個容器含有N個組織時:,透射電鏡容器體積要適當增大;組織不要相互擠壓變形,2動物鈣化硬組織,基本的取材和預固定要求與普通組織相同,預固定充分后(至少過夜),轉入EDTA脫鈣固定液脫鈣,脫鈣務必充分,確保切片操作無障礙,3須灌注固定的動物組織,如圖7所示的石墨碳包覆納米鈷,通過DM軟件的偽色功能,右擊圖片,選擇ImageDisplay中的color,更改涂色模式和色階將圖片上偽色,可以充分提高圖片的顯示效果。
生物樣品TEM各實驗步驟要求,取材和預固定,透射電鏡動物普通組織,一般動物組織的取材,要點一是減少缺血缺氧時間,二是減少機械損傷,麻醉或斷頸處死均可,可根據實驗目的和條件選擇,具體如下:請盡快用戊二醛固定液預固定,如圖5所示,對圖片做選取傅里葉變換,選擇第二種校正方法,出現的變換結果中,選種對應的變換對稱點,點擊ok,出現的對話框中,填入對應晶面的1/d數值,并將單位改為1/nm,點擊ok即可。