龍膽苦苷含量測(cè)定:照高效液相色譜法(《中華人民共和國(guó)藥典》2010版 附錄VI D)測(cè)定。色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn) 以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑;以甲醇-水(25:75)為流動(dòng)相;檢測(cè)波長(zhǎng)為270nm。理論板數(shù)按龍膽苦苷峰計(jì)算應(yīng)不低于3000。對(duì)照品溶液的制備 取龍膽苦苷對(duì)照品適量, 精密稱定,加甲醇制成每l ml 含0.2mg的溶液,即得。供試品溶液的制備 取本品粉末(過(guò)四號(hào)篩)約0.5g,精密稱定,精密加人甲醇20ml,稱定重量,加熱回流15分鐘,放冷,再稱定重量,用甲醇補(bǔ)足減失的重量,搖勻,濾過(guò),濾液備用,精密量取續(xù)濾液2ml ,置10ml量瓶中,加甲醇至刻度,搖勻,即得。測(cè)定法 分別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液各10μl,注人液相色譜儀,測(cè)定,即得。本品按干燥品計(jì)算,龍膽含龍膽苦苷(C 1 6 H 2 0 9 )不得少于3. 0% ;堅(jiān)龍膽含龍膽苦苷(C1S H 2 O s ) 不得少于1.5%
瑞香素對(duì)中樞神經(jīng)系統(tǒng)的影響:鎮(zhèn)痛作用 多種鎮(zhèn)痛實(shí)驗(yàn)表明,注射和灌服瑞香素均有明顯鎮(zhèn)痛作用,并呈劑量依賴性。腹腔注射50mg/kg能明顯減少乙酸所致的小鼠扭體反應(yīng)次數(shù),30mg/kg可延長(zhǎng)熱水刺激引起的小鼠甩尾潛伏期;給狗靜脈注射50mg/kg亦能提高電刺激痛閾值。灌服瑞香素,其ED50在小鼠熱板中為(174±11)mg/kg,在小鼠電刺激中為(296±21)mg/kg[9]。給犬靜脈注射瑞香素50mg/kg,對(duì)電刺激引起的疼痛有明顯抑制作用,但作用維持時(shí)間短。
抗卡氏肺孢子蟲包囊和滋養(yǎng)體作用:瑞香素在體外有一定的抗卡氏肺孢子蟲包囊和滋養(yǎng)體的作用,這種作用呈劑量依賴關(guān)系,在1~20μmol/L的濃度范圍內(nèi),隨藥物濃度增加,抑制Pc生長(zhǎng)的效應(yīng)越大,對(duì)蟲體的線粒體、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)等超微結(jié)構(gòu)有影響,可以引起線粒體、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)腫脹,胞漿溶解并產(chǎn)生空泡。瑞香素可以與Fe2+ 以2:1比例螯合而很少與Mg2+ 螯合,用FeSO4預(yù)先同瑞香素螯合后,它可大大減弱對(duì)Pc生長(zhǎng)影響,而預(yù)先用MgSO4處理的瑞香素對(duì)Pc的生長(zhǎng)影響無(wú)明顯改變。提示瑞香素抗Pc的作用原理是螯合與Pc代謝密切相關(guān)的Fe,從而影響Pc的生長(zhǎng)代謝。