龍膽苦苷含量測定:照高效液相色譜法(《中華人民共和國藥典》2010版 附錄VI D)測定。色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗 以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑;以甲醇-水(25:75)為流動相;檢測波長為270nm。理論板數(shù)按龍膽苦苷峰計算應不低于3000。對照品溶液的制備 取龍膽苦苷對照品適量, 精密稱定,加甲醇制成每l ml 含0.2mg的溶液,即得。供試品溶液的制備 取本品粉末(過四號篩)約0.5g,精密稱定,精密加人甲醇20ml,稱定重量,加熱回流15分鐘,放冷,再稱定重量,用甲醇補足減失的重量,搖勻,濾過,濾液備用,精密量取續(xù)濾液2ml ,置10ml量瓶中,加甲醇至刻度,搖勻,即得。測定法 分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各10μl,注人液相色譜儀,測定,即得。本品按干燥品計算,龍膽含龍膽苦苷(C 1 6 H 2 0 9 )不得少于3. 0% ;堅龍膽含龍膽苦苷(C1S H 2 O s ) 不得少于1.5%
對免疫功能的影響:腹腔注射瑞香素100mg/kg,能使小鼠胸腺和脾臟萎縮,胸、脾指數(shù)分別下降51.1%和20.6%,并與劑量呈正相關(guān)。瑞香素可明顯降低小鼠血清凝集素滴度和溶血素效價,抑制小鼠對SRBC免疫應答反應,降低溶血空斑形成細胞值(PFC)。其對SRBC誘發(fā)的小鼠足墊遲發(fā)超敏反應(DTH)的抑制作用與給藥劑量呈明顯正相關(guān),尚可顯著增加小鼠腹腔巨噬細胞吞噬百分率和吞噬指數(shù)。
抗卡氏肺孢子蟲包囊和滋養(yǎng)體作用:瑞香素在體外有一定的抗卡氏肺孢子蟲包囊和滋養(yǎng)體的作用,這種作用呈劑量依賴關(guān)系,在1~20μmol/L的濃度范圍內(nèi),隨藥物濃度增加,抑制Pc生長的效應越大,對蟲體的線粒體、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)等超微結(jié)構(gòu)有影響,可以引起線粒體、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)腫脹,胞漿溶解并產(chǎn)生空泡。瑞香素可以與Fe2+ 以2:1比例螯合而很少與Mg2+ 螯合,用FeSO4預先同瑞香素螯合后,它可大大減弱對Pc生長影響,而預先用MgSO4處理的瑞香素對Pc的生長影響無明顯改變。提示瑞香素抗Pc的作用原理是螯合與Pc代謝密切相關(guān)的Fe,從而影響Pc的生長代謝。