在透射電鏡中，用電子束代替平行入射光束，用薄膜狀的樣品代替周期性結(jié)構(gòu)物體，就可重復(fù)以上衍射成像過程，（2）對(duì)于透射電鏡，改變中間鏡的電流，使中間鏡的物平面從一次像平面移向物鏡的后焦面，可得到衍射譜，固定的目的主要是終止組織細(xì)胞的生化過程，同時(shí)把它們的超微結(jié)構(gòu)改變控制在zui小范圍內(nèi)，并保護(hù)這些結(jié)構(gòu)在后續(xù)的脫水、包埋等過程中不被破壞；常用雙固定法，用一定濃度的戊二醛對(duì)樣品預(yù)固定，漂洗后使用鋨酸對(duì)樣品進(jìn)行后固定。

2切片厚度50～100nm為宜：太薄反差低；太厚反差好，但結(jié)構(gòu)重疊，電子束不能穿透；，3切片應(yīng)耐電子束的強(qiáng)烈照射，不變形不升華；，4切片能夠適當(dāng)被染色，保證一定的反差；，5切片均勻，無影響拍照的皺褶、刀痕或染色污染，其中，DigitalMicrograph不僅能夠自動(dòng)識(shí)別Gatan公司電鏡拍攝的dm3、dm4、Tif文件中的標(biāo)尺、放大倍數(shù)、儀器型號(hào)等信息，還能夠?qū)D片中進(jìn)行上偽色突出對(duì)比度、選區(qū)傅里葉變換、劃線取向灰度分析等。

鋨酸是強(qiáng)氧化劑，固定脂類、膜結(jié)構(gòu)，有電子染色作用，3脫水，用適當(dāng)?shù)挠袡C(jī)溶劑取代組織和細(xì)胞中的游離態(tài)水分，使之能與包埋劑混合，脫水要徹底，更換液體動(dòng)作要迅速，脫水時(shí)間不宜過長，且固定后的樣品要充分漂洗，4滲透、包埋與聚合，4，1滲透，2包埋與聚合，加溫在60℃聚合形成固體基質(zhì)，牢固地支撐整個(gè)細(xì)胞結(jié)構(gòu)或組織，制成適于機(jī)械切割的固體樹脂包埋塊，利于切片，常用玻璃刀、鉆石刀進(jìn)行超薄切片，刀上要裝水槽，并注入槽液。