如果灌注成功,小心轉(zhuǎn)移動(dòng)物尸體到潔凈托盤(pán)中,透射電鏡zui好用浸濕固定液的雙層紗布仔細(xì)覆蓋動(dòng)物,再覆蓋一層保鮮膜,室溫等待1h,(等待1h的目的是使組織充分定型、硬化,減少手術(shù)切割時(shí)產(chǎn)生的機(jī)械損傷,不確定是否灌注成功時(shí)可不等待立即取材,4植物組織,植物組織取材需注意時(shí)間因素,用包埋樹(shù)脂或其混合液逐漸取代組織內(nèi)的脫水劑,細(xì)胞內(nèi)外所有的空隙被滲透填充,使包埋劑逐步滲透到組織細(xì)胞內(nèi)部,以便與細(xì)胞外的包埋劑同時(shí)聚合。
動(dòng)物組織zui好在離體后1min內(nèi)開(kāi)始固定,透射電鏡非灌注的組織,厚度不超過(guò)4mm,請(qǐng)用恰當(dāng)方式(比如切成寬薄片)體現(xiàn)位置和層次關(guān)系,請(qǐng)盡量不要事先切成很小的顆粒請(qǐng)用鋒利薄刀片切組織,朝一個(gè)方向劃,不要來(lái)回切割,不要擠壓、拉扯,含有食物殘?jiān)⒋罅垦夯蚱渌じ轿锏慕M織,請(qǐng)用生理鹽水漂洗,再投入預(yù)固定液,zui初的30min以后,zui好在4℃的固定液中浸泡,嚴(yán)禁結(jié)冰(太靠近冰箱后壁或冰袋運(yùn)輸都可能使組織結(jié)冰,冬季寧可常溫送樣)。
生物樣品TEM各實(shí)驗(yàn)步驟要求,取材和預(yù)固定,透射電鏡動(dòng)物普通組織,一般動(dòng)物組織的取材,要點(diǎn)一是減少缺血缺氧時(shí)間,二是減少機(jī)械損傷,麻醉或斷頸處死均可,可根據(jù)實(shí)驗(yàn)?zāi)康暮蜅l件選擇,具體如下:請(qǐng)盡快用戊二醛固定液預(yù)固定,如圖5所示,對(duì)圖片做選取傅里葉變換,選擇第二種校正方法,出現(xiàn)的變換結(jié)果中,選種對(duì)應(yīng)的變換對(duì)稱點(diǎn),點(diǎn)擊ok,出現(xiàn)的對(duì)話框中,填入對(duì)應(yīng)晶面的1/d數(shù)值,并將單位改為1/nm,點(diǎn)擊ok即可。