每個容器含有N個組織時:,透射電鏡容器體積要適當增大;組織不要相互擠壓變形,2動物鈣化硬組織,基本的取材和預固定要求與普通組織相同,預固定充分后(至少過夜),轉入EDTA脫鈣固定液脫鈣,脫鈣務必充分,確保切片操作無障礙,3須灌注固定的動物組織,如圖7所示的石墨碳包覆納米鈷,通過DM軟件的偽色功能,右擊圖片,選擇ImageDisplay中的color,更改涂色模式和色階將圖片上偽色,可以充分提高圖片的顯示效果。
請保證固定液量充足,固定液和組織的體積比不小于20:1,組織尺寸和容器關系(只裝一個的參考標準):透射電鏡芝麻到綠豆大小(如小鼠腎上腺):請用1,5mlEP管;,黃豆大小(小鼠腎臟):請用5ml離心管;,鋪展面積類似蠶豆大小的組織片:請用平底的25ml廣口瓶;,zui好刮取細胞,收集在離心管中,1000rpm離心5~10min(初次離心參數可按自己的經驗調整,目的是不損傷細胞結構的情況下去掉培養液成分)。
生物樣品TEM各實驗步驟要求,取材和預固定,透射電鏡動物普通組織,一般動物組織的取材,要點一是減少缺血缺氧時間,二是減少機械損傷,麻醉或斷頸處死均可,可根據實驗目的和條件選擇,具體如下:請盡快用戊二醛固定液預固定,如圖5所示,對圖片做選取傅里葉變換,選擇第二種校正方法,出現的變換結果中,選種對應的變換對稱點,點擊ok,出現的對話框中,填入對應晶面的1/d數值,并將單位改為1/nm,點擊ok即可。