如果灌注成功,小心轉移動物尸體到潔凈托盤中,透射電鏡zui好用浸濕固定液的雙層紗布仔細覆蓋動物,再覆蓋一層保鮮膜,室溫等待1h,(等待1h的目的是使組織充分定型、硬化,減少手術切割時產生的機械損傷,不確定是否灌注成功時可不等待立即取材,4植物組織,植物組織取材需注意時間因素,用包埋樹脂或其混合液逐漸取代組織內的脫水劑,細胞內外所有的空隙被滲透填充,使包埋劑逐步滲透到組織細胞內部,以便與細胞外的包埋劑同時聚合。
動物恰當麻醉,腹部朝上綁定在操作臺上,開腹,透射電鏡有利于觀察灌注效果,不必觀察時,或某些需要保持腹腔器官原位置的實驗,可直接開胸,從劍突下小心剪破膈,使肺回縮(避免剪到肺造成出血),透射電鏡隨后向兩側擴大破口,與腹壁切口靠近,剪斷兩側肋骨,繼續向頭端擴展切口,直到露出心房,用吸管小心棄上清,加入預熱到40℃的GT2專用溶液重懸細胞(輕輕搖勻或吹吸均可,不要有肉眼可見的大塊);立即以3000rpm離心10min。
生物樣品TEM各實驗步驟要求,取材和預固定,透射電鏡動物普通組織,一般動物組織的取材,要點一是減少缺血缺氧時間,二是減少機械損傷,麻醉或斷頸處死均可,可根據實驗目的和條件選擇,具體如下:請盡快用戊二醛固定液預固定,如圖5所示,對圖片做選取傅里葉變換,選擇第二種校正方法,出現的變換結果中,選種對應的變換對稱點,點擊ok,出現的對話框中,填入對應晶面的1/d數值,并將單位改為1/nm,點擊ok即可。